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    请输入基因编号或名称:
    产品分类:
    Namipo 转染试剂
    发布日期:2017-09-02 12:38:35 浏览次数 :
    导读
    NamipoTM 转染试剂Nanoscale micro poly Transfection Reagent方便 无毒 高效产品简介NamipoTM是一种高分子纳米微聚球结构转染试剂

    博乐三张牌外挂:NamipoTM 转染试剂
    Nanoscale micro poly  Transfection  Reagent
     方便   无毒   高效
     

    产品简介

    NamipoTM是一种高分子纳米微聚球结构转染试剂,具有生物相容性,可生物降解。特别适用于RNAi的体外转染,也可以转染高纯度的水溶质粒。Namipo转染时不需要无血清培养,抗生素无影响,不需要与培养基共同孵育,不需要换液,且具备核酸缓释和?;さ墓δ?。


    产品优势

    效率高一点

    yy智勇三张牌 www.hvfh.net Namipo相对于传统的脂质体试剂,表现出更好的转染效率,克服了原代细胞的RNAi转染和部分原代细胞的质粒转染。
      \       \
            siRNA转染原代神经元                                                               质粒转染原代成纤维

    毒性小一点

    转染无需换液,相对于传统质粒体,转染后24h细胞密度至少高出20%。使用Namipo转染RNAi可获得更高的干扰效率。
    \       \
          SiRNA转染RAW264.7细胞状态                                       电镜下的Namipo
     


    价格低一点

    一样的使用比例下,进口试剂是我们价格的一到三倍,超高的性价比也是您选择Namipo一个合适理由。

    Catalog #

    TSBBR001

    TSBBR003

    TSBBR0015

    TSBBR0075

    Size

    0.3 mL

    1mL

    1.5mL

    5X1.5mL

    单价 (CNY)

    800

    2200

    3200

    15000


    使用方法

     

    • siRNA 转染(RNAi)

    RNAi Transfection
     

    A.将siRNA溶于RNase-Free water ,震荡混匀配置成20μM母液,配置方法见附表一。

    B.使用前请用振荡器轻微震荡5s混匀,如有少量沉淀属于正常现象,本品呈透明或乳白色均不影响产品品质。

    C.根据使用量(参考附表三)将Namipo(μl)与siRNA母液(μl) 1:1混合,移液器轻轻吹打10次以上充分混匀,室温或4℃孵育10分钟。

    D.按照使用量将Namipo-SiRNA复合物加入培养基,吹打5-10次混匀,或8字摇匀。转染前后培养基无需特殊处理,24小时内建议不要换液。

    E.转染后检测,若所转染的siRNA带有荧光标记,可在转染12小时后直接观察荧光,观察转染效率。若siRNA不带荧光,转染24-48小时可通过qPCR检测靶基因的表达水平,由于siRNA本身就存在效率问题,为了方便判断转染是否成功,最好设置一组GAPDH的siRNA阳性对照(NamipoTM  转染试剂试剂盒会赠送0.5nmol Fam-NC绿色荧光标记的siRNA对照)。

    • 质粒转染 

    Plasmid DNA Transfection
     

    • 质粒制备必须去内毒素,不可用TE等buffer溶解,否则会严重影响转染效率。
    • Namipo转染试剂使用前请用振荡器轻微震荡5s混匀,如有少量沉淀属于正常现象,产品呈透明或乳白色均不影响产品品质。
    • 根据使用量(参考附表三)将Namipo转染试剂(μl)与无内毒素水溶质粒(μg) 1:1混合,移液器轻轻吹打5-10次充分混匀,室温或4℃孵育10分钟。
    • 按照使用量将Namipo-Plasmid DNA复合物加入培养基,轻轻吹打或8字摇匀。培养基无需特殊处理,24小时内建议不要换液。
    • 转染后检测,若所转染的质粒带有荧光蛋白,可在转染后24-48小时后观察荧光,观察转染效率。若质粒不带荧光,转染后24-48小时可通过qPCR或wb等方法检测转染基因的表达水平,(NamipoTM  转染试剂试剂盒会赠送10ug 无内毒素的copGFP荧光蛋白质粒)。

     
     
    备注:
    附表一 配置20μM溶液用量表


    摩尔量 nmol 0.5 1 2 5 10 20
    溶解量(μL) 25 50 100 250 500 1000
    备注;siRNA合成后一般为干粉,根据提供的nmol数参照表格配置,过程中需要 RNase-Free环境。
    附表二 各种浓度siRNA用量表
    孔板 100nM 50nM 30nM 20nM 10nM 每孔中总体积
    96-well 0.5μL 0.25μL 0.15μL 0.1μL 0.05μL 100μL
    24-well 2.5μL 1.25μL 0.75μL 0.5μL 0.25μL 500μL
    12-well 5μL 2.5μL 1.5μL 1μL 0.5μL 1000μL
    6-well 10μL 5μL 3μL 2μL 1μL 2000μL
     

    备注;体积为20μM母液使用量
    附表三 转染体积参考表


    培养规格
    皿/板
    表面积
    (cm2)
    培养液
    (μL)
    D N A
    (μg)
    Namipo
    (μL)
    R N A i
    (μL)
    Namipo
    (μL)
    种板密度*(个/孔)
    96 well 0.3 100μL 0.3μg 0.3μL 0.3μL 0.3μL 0.5-4 *104
    24 well 2 500μL 1.5μg 1.5μL 1.5μL 1.5μL 0.5-2*105
    12 well 4 1ml 3.0μg 3.0μL 3.0μL 3.0μL 1-3*105
    6  well 10 2ml 6.0μg 6.0μL 6.0μL 6.0μL 2-3*105
    60  mm 20 4ml 12.0μg 12.0μL 12.0μL 12.0μL 8-10*105
    备注;可根据细胞转染难易程度上下调整0.3倍的使用量。推荐的siRNA 转染浓度为60nM,即表格中数值。


    效果反馈

    \  
    Nanop si  VB2细胞 中科院健康所  
    \  
    Nanop Raw264.7 siRNA 交大医学院  
    \  
    Nanop si A549      华西客户  


    文献参考


     

    1.LncRNA-UCA1 exerts oncogenic functions in non-small cell lung cancer by targeting miR-193a-3p

    W Nie, H Ge, X Yang, X Sun, H Huang, X Tao, W Chen… - Cancer letters, 2016 – Elsevier

    2.Effects of BMAL1–SIRT1-positive cycle on estrogen synthesis in human ovarian granulosa cells: an implicative role of BMAL1 in PCOS

    J Zhang, J Liu, K Zhu, Y Hong, Y Sun, X Zhao, Y Du… - Endocrine, 2016 - Springer

    3. Upregulation of the Non-Coding RNA OTUB1-isoform 2 Contributes to Gastric Cancer Cell Proliferation and Invasion and Predicts Poor Gastric Cancer …

    Y Wang, Q Zhang, W Weng, Y Wu, Y Yang… - … journal of biological …, 2016 - ncbi.nlm.nih.gov

    4. OTUB1 promotes tumor invasion and predicts a poor prognosis in gastric adenocarcinoma

    W Weng, Q Zhang, M Xu, Y Wu, M Zhang, C Shen… - Am J Transl Res, 2016 - ajtr.org

    5.TGR5 activation suppressed S1P/S1P2 signaling and resisted high glucose-induced fibrosis in glomerular mesangial cells

    Z Yang, F Xiong, Y Wang, W Gong, J Huang… - Pharmacological …, 2016 - Elsevier

    6.Long non-coding RNA LOC389641 promotes progression of pancreatic ductal adenocarcinoma and increases cell invasion by regulating E-cadherin in a …

    S Zheng, H Chen, Y Wang, W Gao, Z Fu, Q Zhou… - Cancer letters, 2016 - Elsevier

    7.Cyclin Y regulates the proliferation, migration, and invasion of ovarian cancer cells via Wnt signaling pathway

    H Liu, H Shi, Q Fan, X Sun - Tumor Biology, 2016 - Springer

    8.Dynamic quantitative proteomics characterization of TNF-α-induced necroptosis

    Y Wang, ZH Huang, YJ Li, GW He, RY Yu, J Yang… - Apoptosis, 2016 - Springer

    9.Inhibition of cyclooxygenase-2 alleviates liver cirrhosis via improvement of the dysfunctional gut-liver axis in rats

    JH Gao, SL Wen, H Tong, CH Wang… - American Journal of …, 2016 - Am Physiological Soc
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    11. CXCL12/CXCR4 Axis Regulates Aggrecanase Activation and Cartilage Degradation in a Post-Traumatic Osteoarthritis Rat Model

    W Lu, J Shi, J Zhang, Z Lv, F Guo, H Huang… - International Journal of …, 2016 - mdpi.com
    ……
     
     
     
     


     


     


     


     

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