• 望远镜的眼睛有多大?这个参数很关键 2019-03-10
  • 一个地产人非正常死亡的启示:房地产业奇迹不再 ——凤凰网房产上海 2019-03-10
  • 口音让他露马脚 背负3条人命公安部B级逃犯被武汉细心民警揪出 2019-02-27
  • 河曲警方开展遵纪守法、打击赌博违法犯罪宣传活动--黄河新闻网 2019-02-14
  • 石家庄专题片展播--河北频道--人民网 2019-02-14
  • 泛海助学行动获第十二届人民企业社会责任奖年度案例奖 2019-02-12
  • 坚决反对美台任何形式官方往来 2019-02-12
  • 视频:16小时长效持妆 测YSL墨水气垫限量版 2019-02-05
  • 中东部高温降雨齐上阵 长江中下游多省份有暴雨 2019-02-05
  • 2018亚洲CES黑科技:美国巨头展示全新智能手表 2019-01-03
  • 《人民日报》让我爱上了文学(原创首发) 2018-12-04
  • 欢迎来到上海权阳生物科技有限公司官网
    您现在的位置:yy智勇三张牌 > 技术服务 > 细胞生物学服务 > 启动子验证服务 >
    产品
    请输入基因编号或名称:
    产品分类:

     

    启动子效率验证
     

    启动子是基因的重要组成部分,它的主要功能是控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”,决定基因的活动。但启动子本身并不控制基 因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动。启动子一般分为广谱表达型启动子、组织特异性启动子、肿瘤特异性启动子等多种形式?;虻钠舳硬糠址⑸?改变(突变),则可能导致基因表达的调节障碍。这种变化常见于恶性肿瘤。
     

    • 1.启动子是基因的重要组成部分,启动子就像“开关”,决定基因的活动;
    • 2.启动子活性的异常,则可能导致基因表达的调节障碍,从而有可能导致疾病的发生;
    • 3.找到组织特异性启动子,为靶向治疗提供可能;
    • 4.找到某些疾病关键基因异常表达与启动子的关系,为基因治疗提供可能;

     

    研究背景


    鉴于启动子的重要功能,目前对启动子的研究仍旧是一个热门话题。


     

    启动子特点

     

    • 1.通常含一些特定的元件,如TATA box
    • 2.具有方向性:启动下游的基因的表达
    • 3.启动子长度的不确定性
    • 4.一个基因通常含有多个启动子,启动不同转录本的表达
    • 5.某些启动子具有表达的时空性和组织特异性。
    •  
     

    研究思路


    对启动子功能及结构的研究,可以从以下几个方面着手:

    • 1.启动子结构研究,包括核心启动子区域、正调控区域、幅调控区域及增强子的确定
    • 2.组织特异性启动子筛选及确定
    • 3.转录因子与顺式作用元件相互作用研究
    • 4.启动子甲基化作用研究
    • 5.新顺式作用元件发现及功能鉴定
    •  


    研究路线



    研究所涉及到的实验技术

     

    • 1.生物信息学预测;
    • 2.DNA提取及合成;
    • 3.载体构建;
    • 4.细胞培养及转染;
    • 5.双荧光检测;
    • 6.甲基化检测;
    • 7.qPCR;
    • 8.EMSA;
    • 9.chIP等。
    •  

    启动子荧光素酶验证
     

    pGL4启动子报告克隆在Luc2报告基因上游插入一段1.2~1.5 kb的序列,这段插入序列与基因转录起始位点(TSS)上游大约1.5kb到下游200bp之间的5'侧翼序列一致,可以通过观察荧光素酶的活性来研究启动子对基因的调节作用。

    权阳生物可提供预制和定制的pGL-Promoter启动子克隆,包括单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。单报告基因载体系统以Rluc、 mCherry或GFP作为启动子的报告基因;双报告基因载体系统以Luc作为启动子报告基因,以Rluc作为信号标准化的内参,可在活细胞中对超过15000种人和16000种小鼠启动子进行实时活性分析。




    图1.pGL4 启动子报告克隆工作流程
     

    双报告系统

    yy智勇三张牌 www.hvfh.net pGL 启动子克隆可以将Rluc作为第二个报告子和内参。这种双报告系统可以对多样本常规转染进行精确比较。

    yy智勇三张牌  

    图2. 不同启动子在H1B1B和HEK293T细胞中的活性分析。双报告系统启动子克隆和对照以两个重复转染进两种细胞中。转染24小时((HEK293T)和48小时(H1B1B)后分析样品。NEG(包含非启动子序列)和和EMPTY(载体不含启动子)作为阴性对照。

     

     

  • 望远镜的眼睛有多大?这个参数很关键 2019-03-10
  • 一个地产人非正常死亡的启示:房地产业奇迹不再 ——凤凰网房产上海 2019-03-10
  • 口音让他露马脚 背负3条人命公安部B级逃犯被武汉细心民警揪出 2019-02-27
  • 河曲警方开展遵纪守法、打击赌博违法犯罪宣传活动--黄河新闻网 2019-02-14
  • 石家庄专题片展播--河北频道--人民网 2019-02-14
  • 泛海助学行动获第十二届人民企业社会责任奖年度案例奖 2019-02-12
  • 坚决反对美台任何形式官方往来 2019-02-12
  • 视频:16小时长效持妆 测YSL墨水气垫限量版 2019-02-05
  • 中东部高温降雨齐上阵 长江中下游多省份有暴雨 2019-02-05
  • 2018亚洲CES黑科技:美国巨头展示全新智能手表 2019-01-03
  • 《人民日报》让我爱上了文学(原创首发) 2018-12-04